Cry3a杀虫蛋白基因的合成优化及在JK-SH007中高效表达

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作   者：

李阳;  吴酬飞;  吴小芹;  叶建仁;  张立钦; 

作者机构：

湖州师范学院;  南京林业大学林学院; 

关键词：

杀虫活性;  表达;  Cry3a基因;  苏云金芽孢杆菌;  吡咯伯克霍尔德氏菌; 

期刊名称：

中国生物工程杂志

基金项目：

基于松材线虫EMS突变的Cry5Ba3蛋白毒杀分子机制研究

i s s n：

1671-8135

年卷期：

2017 年 06 期

页   码：

70-77

摘   要：

人工合成优化Cry3a杀虫蛋白基因,并从大肠杆菌BL21(DE3)中克隆T7表达系统,通过同源重组克隆进PHKT2表达载体,将此表达载体导入吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007,通过诱导表达,成功指导合成T7 RNA聚合酶且高效表达分子量为70k Da的Cry3a蛋白。通过粗提液对二龄榆蓝叶甲进行生物毒杀试验,结果表明粗提液具有高毒性,致死中浓度(LC_(50)=0.63(0.48-0.82)g/L)。成功构建的T7表达系统,可高效表达毒性的Cry3Aa蛋白,为进一步开发杀虫生防菌剂,建立外源基因表达技术平台奠定了基础。