犬瘟热病毒一步法荧光定量PCR检测方法的建立

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作   者：

付运星;  吴永丽;  徐道修;  崔振强;  冷春青;  伊鹏霏;  中海清;  冯娜;  赵梓淇; 

作者机构：

吉林大学动物医学学院;  军事医学科学院军事兽医研究所; 

关键词：

犬瘟热病毒;  标准品RNA;  核衣壳蛋白基因;  荧光定量PCR; 

期刊名称：

中国兽医学报

基金项目：

i s s n：

1005-4545

年卷期：

2016 年 36 卷 03 期

页   码：

407-411

摘   要：

为建立犬瘟热病毒(CDV)TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,根据CDV核衣壳蛋白(NP)基因序列,设计合成2对通用引物和1条通用探针,通过体外转录构建绝对定量标准品RNA。对荧光定量PCR方法的各项条件进行优化,建立CDV荧光定量PCR检测方法,该方法检测灵敏度可达4.02拷贝/μL,比普通RT-PCR方法的灵敏度高出100倍,具有良好的重复性。对犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV-1)、犬冠状病毒(CCV)、犬副流感病毒(CPIV)核酸检测为阴性,具有很好的特异性。研究结果表明,建立的CDV荧光定量PCR方法具有敏感性高、特异性强、重复性好的特点,为犬瘟热的早期诊断提供了重要的技术支撑。