碱地黑牛ELOVL2和ELOVL5基因的克隆测序及表达分析研究

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作   者：

张文琦;  刘瑞莉;  王胜;  于堃;  韩明轩;  陈振鹏;  柏学进;  董雅娟; 

作者机构：

青岛农业大学动物科技学院;  黑牛种业技术创新中心; 

关键词：

ELOVL5;  ELOVL2;  qRT-PCR;  生物信息学分析;  碱地黑牛; 

期刊名称：

中国畜牧杂志

i s s n：

0258-7033

年卷期：

2023 年 003 期

页   码：

148-154

摘   要：

超长链脂肪酸延长酶（Elongation of Very Long Chain Fatty Acids,ELOVLs）是合成脂肪酸过程中的关键酶，与脂类的合成以及脂肪酸的代谢密切相关。本实验旨在研究碱地黑牛ELOVL2、ELOVL5基因CDS区序列及其在机体各组织中的表达情况，探讨ELOVL2、ELOVL5基因理化性质及表达规律。通过克隆获得的碱地黑牛ELOVL2和ELOVL5基因CDS区分别为885、900 bp，编码294、299个氨基酸，均为疏水性蛋白；进化树显示碱地黑牛ELOVL2、ELOVL5基因与牛、山羊、绵羊同源性最高。α-螺旋和无规则卷曲是主要的二级结构，对二者三级结构及氨基酸序列进行对比，发现ELOVL2氨基酸序列中第234位的半胱氨酸等同于ELOVL5中第231位的色氨酸，ELOVL2 C234和ELOVL5等效位置的W231对底物结合的特异性有影响，若将ELOVL5 W231替换到ELOVL2中的等效位置，ELOVL2将DPA转化为24:5n-3的能力丧失。亚细胞定位结果显示ELOVL2、ELOVL5蛋白主要定位在内质网上，荧光定量PCR实验结果显示二者均在肝脏中表达量最高。综上，ELOVL2、ELOVL5基因在促进脂肪酸合成过程中发挥着重要的作用。