凋亡相关斑点样蛋白不同表位抗体对β淀粉样蛋白聚集及神经毒性作用的研究

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作   者：

赖霞;  刘河;  朱晓鹏;  龙艳;  邓娟; 

作者机构：

陆军军医大学大坪医院健康管理中心; 

关键词：

抗体;  凋亡相关斑点样蛋白;  表位;  阿尔茨海默病;  细胞毒性,免疫;  β淀粉样蛋白; 

期刊名称：

中华老年心脑血管病杂志

i s s n：

1009-0126

年卷期：

2024 年 003 期

页   码：

341-343

摘   要：

目的 探讨凋亡相关斑点样蛋白（ASC）不同表位抗体对β淀粉样蛋白（Aβ）聚集和神经毒性的作用。方法 SH-SY5Y-APP695细胞培养体系培育按实验目的分组：A组（25μmol/L Aβ）、B组（2μmol/L ASC）、C组（2μmol/L ASC+25μmol/L Aβ+10μg/ml AL177）、D组（2μmol/L ASC+25μmo/L Aβ+10μg/ml ab155970）、E组（25μmol/L Aβ+2μmol/L ASC）用于探讨重组ASC蛋白与Aβ蛋白结合。对照组[磷酸盐吐温缓冲液（PBST）]、Aβ组（10μmol/L Aβ）、Aβ+N端组（10μmol/L Aβ+10μg/ml AL177）、Aβ+C端组（10μmo/L Aβ+10μg/ml ab155970）用于探讨细胞炎性反应。Ⅰ组（PBST）、Ⅱ组（10μmol/L Aβ）、Ⅲ组（10μmol/L Aβ+10μg/ml AL177）、Ⅳ组（10μmol/L Aβ+10μg/ml ab155970）用于细胞毒性检测。N端组[10μg/ml AL177+10μg/ml异硫氰酸荧光素（FITC）-Aβ42]、C端组(10μg/ml ab155970+10μg/ml FITC-Aβ42)、空白组（PBST）用于免疫荧光染色。结果与A组比较，C组细胞中Aβ聚集减少，D组Aβ聚集增多（P＜0.01）。与对照组比较，Aβ+C端组Aβ引起的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1含量明显增高，差异有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）。噻唑蓝法检测结果显示，Ⅱ组细胞活性低于Ⅰ组，差异有统计学意义（1.12±4.25 vs 0.73±5.68,P＜0.01）;Ⅲ组细胞活性明显高于Ⅱ组，差异有统计学意义（1.28±2.21 vs 0.73±5.68,P＜0.05）。结论 ASC蛋白N端抗体AL177抑制Aβ聚集，ASC蛋白C端抗体ab155970促进Aβ聚集，并具有时间依赖性。C端抗体刺激Aβ引起炎性反应，N端抗体拮抗对Aβ神经细胞毒性。表明ASC不同表位抗体对Aβ聚集及神经毒性具有不同作用，对阿尔茨海默病防治有一定的应用前景。