骨髓源性间充质干细胞通过抑制EMT改善TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞纤维化

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作   者：

赵瑜;  李佳凌;  刘霞;  吴佩晨;  高小青;  周正丽;  陈波; 

作者机构：

西南医科大学科技大楼病理公共平台;  西南医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室;  西南医科大学临床医学专业2019级7班; 

关键词：

肾小管间质纤维化;  上皮间质转化;  半乳凝集素-3;  间充质干细胞; 

期刊名称：

四川解剖学杂志

i s s n：

1005-1457

年卷期：

2022 年 30 卷 001 期

页   码：

1-6

摘   要：

目的:探索骨髓源性间充质干细胞(MSCs)条件培养基是否通过调控galectin-3/Akt/GSK3β1/Snail信号通路抑制上皮细胞-间充质细胞转换(EMT)改善抗转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)纤维化.方法:①无菌条件下取年轻SD大鼠股骨和胫骨骨髓贴壁培养,常规体外传代培养至P3代后,更换无血清的低糖DMEM培养基培养48h,收集细胞上清制备MSCs条件培养上清(SF-MSCs-CM).②按照正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)的干预方式将其分5组,正常组(不干预)、TGF-β1干预组、TGF-β1+SF-MSCs-CM干预组、TGF-β1+SF-DMEM(无血清低糖 DMEM)干预组以及 SF-MSCs-CM 组.人重组 TGF-β1(15ng/mL)处理 NRK-52E细胞72h建立大鼠肾间质纤维化模型.建模成功后的干预组再分别用SF-MSCs-CM和SF-DMEM处理24h,SF-MSCs-CM 组仅加SF-MSCs-CM处理24h.③利用慢病毒载体转染NRK-52E细胞,建立galectin-3敲低(Gal-3 KD)和galectin-3过表达(Gal-3 OE)工具细胞,分组及处理同前述.采用免疫印迹法检测纤维化相关指标.结果:TGF-β1明显上调 NRK-52E 中 α-SMA、FN、galectin-3、Snail、KIM-1 的表达,以及 TIMP1 与 MMP9、P-Akt 与 Akt、P-GSK-3β 与GSK-3β的比值,显著下调E-cadherin的表达.SF-MSCs-CM显著增加E-cadherin的表达,显著降低上述其他表达.无论是Gal-3 KD NRK-52E还是Gal-3 OE NRK-52E,SF-MSCs-CM干预组均表现出类似的作用趋势,而SF-MSCs-CM对Gal-3 KD NRK-52E的抗纤维化作用较Gal-3 OE NRK-52E更为明显.结论:SF-MSCs-CM可能通过抑制galectin-3/Akt/GSK-3β/Snail信号通路抑制EMT产生,改善TGF-β1诱导的肾纤维化.Galectin-3可能是一个有潜在临床价值的抗纤靶点.