敲减核苷酸交换因子SIL1的表达抑制肿瘤蛋白53突变型胶质瘤细胞迁移和干细胞特性

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作   者：

吴力新;  宋振宇;  朱旭强;  林文阳; 

作者机构：

郑州大学第一附属医院神经外科; 

关键词：

肿瘤蛋白53;  胶质瘤;  干细胞;  迁移;  核苷酸交换因子SIL1; 

期刊名称：

中华实验外科杂志

i s s n：

1001-9030

年卷期：

2022 年 39 卷 007 期

页   码：

1310-1313

摘   要：

目的 探究胶质瘤中核苷酸交换因子SIL1(SIL1)与肿瘤蛋白53(TP53)的关系,观察敲减SIL1对TP53突变型胶质瘤细胞增殖、迁移和干细胞特性的影响.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测TP53突变型胶质瘤细胞系SW1088、U-118 MG和TP53野生型细胞系U87中SIL1 mRNA和蛋白表达的差异;在U-118 MG细胞中转染野生型TP53过表达质粒,Western blot检测TP53和SIL1蛋白表达变化.然后将U-118 MG细胞随机分成3组,对照组(不进行任何处理)、对照短发卡RNA(shRNA)组(转染对照shRNA质粒)和Sh-SIL1组(转染Sh-SIL1质粒).细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验检测细胞增殖情况;Transwell检测细胞迁移;Western blot检测干细胞特性相关基因OCT4和CD133的表达.多组间差异比较采用单因素方差分析,两组间差异比较采用t检验.结果 SW1088和U-118 MG细胞中SIL1 mRNA和蛋白水平均高于 U87 细胞(SIL1 mRNA:2.16±0.19 比 1.00±0.06,t=9.804,P<0.01;3.51±0.24 比1.00±0.06,t=17.350,P<0.01.SIL1 蛋白:0.52±0.06 比 0.16±0.07,t=7.315,P<0.01;1.16±0.11比0.16±0.07,t=13.680,P<0.01).在U-118 MG细胞中转染野生型TP53过表达质粒后,TP53蛋白表达高于空载体组(2.00±0.13比0.15±0.06,t=21.950,P<0.01),而SIL1蛋白表达低于空载体组(0.07±0.01 比 0.24±0.03,t=9.128,P<0.01).Sh-SIL1 组中 SIL1 蛋白水平(0.05±0.03 比 0.36±0.04,t=9.539,P<0.01),细胞活力(t48=8.317,P<0.01;t72=10.310,P<0.01),克隆形成数目(115±9 比 167±15,t=4.997,P<0.01),迁移细胞数目(31.33±4.16 比 67.33±7.51,t=7.265,P<0.01),OCT4(0.25±0.04 比 0.61±0.05,t=9.227,P<0.01)和 CD133(0.09±0.02比0.35±0.03,t=11.960,P<0.01)蛋白表达均低于对照shRNA组.结论 SIL1在TP53突变的胶质瘤细胞中表达增加,野生型TP53可抑制SIL1的表达.在TP53突变的胶质瘤细胞中敲减SIL1可抑制细胞增殖、迁移和干细胞特性.