CRISPR-Cas技术在动物病原微生物检测中的应用研究进展

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作   者：

原青;  孟茹;  李国平;  张瑞; 

作者机构：

西宁市动物疫病预防控制中心;  西南民族大学畜牧兽医学院;  大通县畜牧兽医站; 

关键词：

病原微生物;  病原体检测;  CRISPR-Cas;  应用; 

期刊名称：

中国畜牧兽医

i s s n：

1671-7236

年卷期：

2025 年 52 卷 002 期

页   码：

545-553

摘   要：

动物传染病是对养殖业危害最严重的一类疾病，不仅造成动物大量死亡及其产品的损失，而且对人类健康构成重大威胁。因此，快速、准确和廉价的病原体检测方法对动物传染病防控具有重要意义。规律成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats, CRISPR)及相关蛋白(CRISPR associated protein, Cas)系统是一种灵敏、特异的生物系统，可快速识别病原体特异性核酸，在原核生物免疫系统中发挥重要作用。基于CRISPR-Cas系统的病原体检测方法具有特异性强、灵敏度高和操作便捷等优点，在动物病原微生物快速检测中具有良好的应用前景。笔者系统介绍了Ⅱ型(cas9)、Ⅴ型(cas12a、cas12b、cas14a)和Ⅵ型(cas13a)CRISPR-Cas系统，简述其工作原理和基于CRISPR-Cas系统建立的NASBA-CRISPR、CAS-EXPAR、CASLFA、DETECTR、CORDS、HOLMESv2、SHERLOCK、SHERLOCKv2、DETECTR-Cas14等快速检测方法在动物病原微生物检测中的研究及应用现状，同时对CRISPR-Cas系统在动物病原检测应用中面临的问题进行了分析，包括crRNA的特异性、与扩增技术联用、样本采集和运输方式等因素对定量检测产生的影响，并提出了一些解决方案，旨在为更深入地了解CRISPR-Cas技术在动物病原微生物检测上的应用提供参考。