鸡pro-IL-1β表达、多克隆抗体制备与初步应用

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作   者：

许萌萌;  黄萌萌;  牛鑫鑫;  王国栋;  于航博;  张玉龙;  韩京哲;  韩金泽;  刘润杭;  吴子文;  于晓雪;  王笑梅;  高玉龙;  李留安;  祁小乐; 

作者机构：

天津农学院动物科学与动物医学学院;  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 

关键词：

鸡;  克隆;  pro-IL-1β;  表达;  炎症;  多克隆抗体; 

期刊名称：

中国家禽

i s s n：

1004-6364

年卷期：

2024 年 46 卷 010 期

页   码：

89-96

摘   要：

为研究禽类疫病病原触发炎症的分子机制，试验克隆和分析鸡源白细胞介素-1β前体（Interleukin-1β precursors,pro-IL-1β）基因，原核表达和纯化pro-IL-1β蛋白，用纯化的pro-IL-1β蛋白免疫小鼠制备pro-IL-1β多克隆抗体，对该抗体进行ELISA效价检测和鉴定，并初步测试了该抗体在间接免疫荧光试验和Western blot试验中的应用效果。结果显示：重组蛋白pro-IL-1β成功表达，分子量约37 ku，能与His标签抗体发生特异性结合反应；获得了ELISA效价高于1∶32 000的鼠抗pro-IL-1β多克隆抗体，该抗体可通过间接免疫荧光试验（IFA）检测到pro-IL-1β真核表达蛋白，也可通过Western blot试验检测到pro-IL-1β原核表达蛋白和真核表达蛋白，还可通过Western blot和IFA检测到传染性法氏囊病病毒（IBDV）诱发的巨噬细胞HD11内源性pro-IL-1β蛋白的表达。研究表明，试验成功制备鸡pro-IL-1β多克隆抗体，为进一步研究禽病病原诱发炎症的分子机制提供了重要工具。