基于紫芝基因组的倍半萜合酶基因的发掘与功能鉴定

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作   者：

王丽芝;  王海英;  浦香东;  孙思杰;  魏建和;  孙超; 

作者机构：

天津中医药大学中药学院;  中国医学科学院&北京协和医学院药用植物研究所; 

关键词：

生物合成;  倍半萜合酶;  紫芝; 

期刊名称：

中国科学:生命科学

基金项目：

甾体生物碱贝母辛生物合成途径关键酶基因的挖掘与验证
灵芝萜类合酶的产物多样性及其形成机制研究

i s s n：

1674-7232

年卷期：

2018 年 04 期

页   码：

447-454

摘   要：

灵芝(Ganoderma lucidum)是目前研究最深入的药用真菌之一,也是作为研究天然产物生物合成的理想模式真菌.本研究通过对担子菌亚门灵芝属紫芝(Ganoderma sinense)基因组的数据挖掘发现两个倍半萜合酶基因.利用RT-PCR方法从紫芝菌丝体总RNA中扩增出两者的全长cDNA序列,将两个倍半萜合酶的编码序列克隆到表达载体中在大肠杆菌中进行异源表达,变性蛋白电泳显示两者都可以可溶性的形式在大肠杆菌中表达.顶空固相微萃取-气相色谱质谱法分析显示,重组紫芝萜类合酶具有明显的催化活性,可合成多个倍半萜类产物.本研究为进一步揭示真菌倍半萜合酶的结构与功能的相关性及其产物多样性形成机制奠定了基础.