基于量子点技术的猪伪狂犬病病毒gB抗体免疫层析试纸研究

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作   者：

杨苏珍;  刘运超;  邢云瑞;  孙亚宁;  尚延丽;  张改平; 

作者机构：

河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;  河南省农业科学院; 

关键词：

抗体;  伪狂犬病病毒（PRV）;  试纸;  量子点;  猪; 

期刊名称：

中国畜牧兽医

i s s n：

1671-7236

年卷期：

2023 年 010 期

页   码：

4160-4167

摘   要：

【目的】建立一种基于量子点（quantum dots, QDs）技术的猪伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）gB抗体免疫层析试纸，为PRV疫苗免疫效果评估提供一种快速、简便的检测技术。【方法】选用昆虫细胞表达系统表达的gB蛋白，采用羧基修饰的水溶性QDs,在偶联剂1-乙基-3[3-二甲基氨基丙基]碳二亚胺盐酸盐（EDC）的作用下制备gB-QDs荧光标记物。将金黄色葡萄球菌蛋白A（Staphylococcus aureus protein A,SPA）和抗gB蛋白的单克隆抗体分别固定在硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线，将样品垫、标记垫、吸水垫、支撑底板按生产工艺组装成基于QDs的荧光免疫层析试纸。检测该试纸的特异性、敏感性及与商品化ELISA试剂盒的符合率。【结果】敏感性试验结果显示，该试纸的敏感性为1∶6 400。特异性试验结果显示，该试纸与猪瘟病毒（CSFV）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）阳性血清均无交叉反应，特异性为100%。通过检测田间猪血清样品，对比商品化ELISA检测试剂盒，结果显示，113份田间猪血清样品中，两种方法检测结果不一致的血清有11份，结果一致的血清有102份，该试纸与商品化ELISA试剂盒的符合率为90.3%。【结论】本研究制备的试纸检测线紫外灯下显色清晰可见，辨识度高，具有较高的特异性和敏感性，可用于PRV gB抗体的检测。