α-淀粉酶成熟蛋白N-端氨基酸序列变化对蛋白分泌的影响

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作   者：

陈启民;  刘淑红;  纪永刚;  薛志宏;  傅鹏;  耿海榕;  马明;  孙庆;  梁栋;  耿运琪; 

作者机构：

南开大学生命科学学院; 

关键词：

α－淀粉酶，定点诱变，pAmy413C，蛋白质分泌，结构分析; 

期刊名称：

遗传学报

i s s n：

0379-4172

年卷期：

1998 年 03 期

页   码：

摘   要：

从地衣芽孢杆菌（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）构建的重组质粒ｐＡｍｙ４１３，经过定点诱变，在α－淀粉酶基因的２７１位引入Ｇ取代原来的Ａ，构建成突变型质粒ｐＡｍｙ４１３Ｃ。成熟的α－淀粉酶氨基酸由＋２Ａｓｎ变为＋３Ａｓｐ，其产量是野生型的２．０２－２．５７倍；Ｎ－端氮基酸序列分析发现：信号肽酶Ｉ的切割位点前移了一个氨基酸，即ＡｌａＡｌａ－＋３Ａｓｐ；二级结构分析发现：在自由能为－５１．７ｋｃａｌ时，突变型与野生型的ｍＲＮＡ都形成１４个环状结构，区别在于２７１位的Ｇ不再与２１１位的Ｕ配对，形成Ｇ突出；蛋白质二级结构分析发现：３３－３７氨基酸的转角结构减少了１个氨基酸，这个氦基酸参与形成α－螺旋；这些空间结构和荷电氮基酸的变化有利于蛋白质的分泌。