猪瘟病毒cF114株E_2基因在家蚕杆状病毒表达系统中的融合表达

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作   者：

郑小坚;  贡成良;  曹广力;  朱江;  薛仁宇;  缪竞诚;  沈卫德; 

作者机构：

苏州大学医学院;  苏州大学生命科学学院; 

关键词：

杆状病毒;  家蚕;  猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2基因;  融合表达; 

期刊名称：

蚕业科学

基金项目：

利用RNAi和转基因技术提高家蚕BmNPV抗性的研究

i s s n：

0257-4799

年卷期：

2006 年 32 卷 03 期

页   码：

340-344

摘   要：

为进一步利用家蚕杆状病毒表达系统研制猪瘟病毒(CSFV)新型的亚单位疫苗,将猪瘟病毒cF114株囊膜糖蛋白E2基因克隆至带有GST标签的分泌表达杆状病毒转移载体pAcSecG2T的EcoRⅠ和BamHⅡ位点之间,获得了带有杆状病毒囊膜蛋白gp67信号肽-GST-E2元件的重组杆状病毒转移载体pAcSecG2T-E2,与线性化家蚕杆状病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕BmN细胞,筛选重组病毒(Bm-BacPAK6-E2),PCR证实所分离的重组病毒含有目的片段E2基因。SDS-PAGE图谱显示,感染重组病毒后,在细胞培养液上清和家蚕幼虫、蛹的血淋巴中均可检测到一条分子量为63 kD左右的特异性条带;感染Bm-BacPAK6-E2家蚕蛹的血淋巴可检测到GST活性,接种病毒148 h后重组蛋白的表达水平达到17.11μg/mL。