基于RAA-CRISPR/Cas12a技术的桃成分单管一体化快速检测方法

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作   者：

王琳;  邢冉冉;  于耀鲜;  易秋菊;  卢思远;  邓婷婷;  王旭;  陈颖; 

作者机构：

中国检验检疫科学研究院;  天津科技大学食品工程与生物技术学院; 

关键词：

重组酶介导的等温扩增;  单管一体化;  桃成分;  快速检测;  CRISPR/Cas12a; 

期刊名称：

食品科学

i s s n：

1002-6630

年卷期：

2024 年 45 卷 021 期

页   码：

21280-21287

摘   要：

通过设计特异性的桃重组酶介导的等温扩增（recombinase-aided amplification,RAA）和CRISPR RNA（crRNA）引物，建立RAA技术结合CRISPR/Cas12a系统的单管一体化桃成分快速检测方法，并分析该方法的特异性、灵敏度和检出限，同时对市售样品进行检测。结果显示，该方法不依赖大型仪器设备，在30 min内即可完成桃成分的快速检测；与其他常见水果物种之间无交叉污染，表现出良好的特异性；该方法的灵敏度为1.0×10-1 ng/μL；检出限为1%；通过对20份市售样品检测，结果显示本方法与实时聚合酶链式反应法检测结果一致。因此，本研究建立的RAA-CRISPR/Cas12a单管一体化桃成分快速检测方法具有特异性好、灵敏度高的优点，为桃成分快速检测提供了一种新的技术。