宁夏枸杞铁镉响应基因的筛选及其功能验证

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作   者：

余慧;  王静;  梁昕昕;  辛亚平;  周军;  赵会君; 

作者机构：

北方民族大学生物科学与工程学院国家民委黄河流域农牧交错区生态保护重点实验室; 

关键词：

镉胁迫;  转基因酵母;  铁胁迫;  实时荧光定量PCR;  宁夏枸杞; 

期刊名称：

生物技术通报

i s s n：

1002-5464

年卷期：

2023 年 39 卷 007 期

页   码：

195-205

摘   要：

为探讨铁(Fe)、镉(Cd)胁迫对宁夏枸杞LbFRO(ferric reduction oxidase)、LbZIP(zinc-regulated transporters and iron-regulated transporter-like protein)和LbNRAMP(natural resistance-associated macrophage protein)基因的表达模式的影响,为防治宁夏枸杞黄叶病、培育高效Fe利用枸杞品种和低镉累积品种提供理论基础及技术支持.以宁夏枸杞 1 号组培幼苗为试验材料,利用转录组测序技术分析筛选宁夏枸杞中与Fe和Cd吸收转运相关的基因;利用实时荧光定量PCR技术验证目的基因在Fe、Cd胁迫下的表达变化情况;利用常规PCR方法克隆获得全长序列并进行生物信息学分析;构建酵母表达载体转化Fe/Cd敏感型酵母菌株ΔCCC1/YK44 进行转基因酵母功能验证.结果显示,LbIRT2、LbFRO以及LbNRAMP3 受Fe和Cd胁迫后显著上调表达;系统进化树分析表明宁夏枸杞Fe、Cd响应基因与水稻和拟南芥亲缘关系较近;转基因酵母功能进一步验证了LbFRO、LbIRT2 以及LbNRAMP3能增强酵母对Fe和Cd的敏感性.LbFRO、LbIRT2以及LbNRAMP3可能参与了枸杞对Fe和Cd的吸收和转运.