恙虫病东方体的分离及外膜蛋白基因序列分析

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作   者：

操敏;  郭恒彬;  郁兴明;  杨文富;  王柏仁;  张云;  吴光华;  唐家琪; 

作者机构：

平潭73301部队 ;  南京军区军事医学研究所 南京210002 ;  南京210002 ;  南京军区军事医学研究所;  福清市73303部队 ;  南京210002; 

关键词：

东方体;  序列分析;  同源性;  春季恙虫病;  分离; 

期刊名称：

中国公共卫生

基金项目：

i s s n：

1001-0580

年卷期：

2004 年 09 期

页   码：

摘   要：

目的　对福建省平潭岛的恙虫病病人、宿主动物和媒介恙螨进行现场调查和恙虫病东方体分离 ,并对其5 6kD外膜蛋白基因序列进行测定和分析 ,为有针对性的防制提供依据。方法　将病人血、鼠脏器、地里纤恙螨标本分别腹腔接种小白鼠分离东方体 ,小鼠腹壁刮液经Gimesa染色镜检 ;PCR扩增分离株的东方体 5 6kD外膜蛋白基因片段 ,并进行测序及多序列比较和进化树分析。结果　其中 1份病人血标本、1份鼠脏器标本及 1份恙螨标本腹腔接种的小白鼠 ,12d后出现耸毛、弓背、厌食、腹部增大等典型东方体感染症状 ,解剖后见肝脾肿大或腹水 ,显微镜下清淅可见细胞浆内短杆状或球杆状东方体 ,共分离出Pt1、Pt2、及Pt33株东方体。 3株东方体用设计的引物分别扩增出约 135 0bp特异性 5 6kD基因片段。序列测定结果表明 ,此 3株东方体之间 5 6kD基因片段同源性大于 99%。它们与Ot标准株Karp、Kato、Gilliam及地方株Kawassaki、Kuroki的同源性分别为 93 8% ,6 6 2 % ,85 1% ,6 9 6 % ,84 2 %。