新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备

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作   者：

毕庄莉;  朱英奇;  陈宗艳;  李传峰;  孟春春;  王桂军;  刘光清; 

作者机构：

安徽农业大学;  中国农业科学院; 

关键词：

原核表达;  新型鸭呼肠孤病毒;  σC基因;  多克隆抗体; 

期刊名称：

浙江农业学报

基金项目：

兔出血症病毒翻译起始与调控机制研究
鸭肝炎病毒VP1基因在病毒致病和免疫中的作用研究
甲型鸭肝炎病毒2A蛋白在病毒复制和翻译过程中的作用机制研究

i s s n：

1004-1524

年卷期：

2014 年 26 卷 04 期

页   码：

882-886

摘   要：

为了解新型鸭呼肠孤病毒(NDRV TH11株)σC蛋白的抗原性,采用RT-PCR方法扩增了NDRV TH11株σC蛋白的编码基因,将其克隆于原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达His-σC重组蛋白。SDS-PAGE和Western blot分析表明该重组蛋白获得高效表达,并具有较好的反应原性。以纯化的σC蛋白免疫实验兔制备了抗σC蛋白的多克隆抗体,间接ELISA检测结果显示其效价达1∶20 000以上;间接免疫荧光试验表明,多克隆抗体能够特异性识别NDRV的σC蛋白,显示出σC蛋白具有良好的免疫原性。