雷公藤内酯甲通过抑制巨噬细胞M2极化发挥抗肺癌作用

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作   者：

白薇超;  刘亚;  庞亚梅;  李宏;  宁谦; 

作者机构：

西安交通大学第一附属医院呼吸与危重症医学科;  西安交通大学第一附属医院肿瘤内科; 

关键词：

雷公藤内酯甲;  巨噬细胞M2极化;  免疫微环境;  非小细胞肺癌;  雷公藤; 

期刊名称：

现代生物医学进展

i s s n：

1673-6273

年卷期：

2024 年 24 卷 016 期

页   码：

3013-3019

摘   要：

目的:探讨雷公藤内酯甲(Wilforlide A,WA)对肺癌细胞增殖和侵袭及巨噬细胞M2极化的影响.方法:(实验一):将肺癌细胞LLC按照WA处理浓度分为0、0.01、0.1、1和10μg/L组.WA孵育48h后,采用MTT法、Annexin V-FITC/PI染色法和Transwell法检测细胞增殖、凋亡和侵袭.采用Western blot检测Bcl-2、Bax、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平.(实验二):将单核巨噬细胞RAW264.7按照WA处理浓度分为0、0.01、0.1、1和10 μg/L组.采用MTT法检测细胞增殖.然后再将RAW264.7细胞为Control组、IL-4组、WA组和IL-4+WA组.使用10 ng/mL的IL-4和1μg/L的WA培养细胞24 h.采用ELISA法检测细胞培养上清液中CD206、Arg-1和IL-10水平.(实验三):细胞分组如下:Blank组、RAW264.7组、IL-4 RAW264.7组、WA组和IL-4 RAW264.7+WA组.按照分组方案,将LLC细胞分别与RAW264.7细胞、IL-4诱导RAW264.7细胞以及10μg/L的WA共培养24h,然后检测细胞增殖、凋亡、侵袭及细胞培养上清液中的M2型巨噬细胞标志物水平.流式细胞仪检测CD86和CD206阳性百分比.结果:(实验一):与0 μg/L组比较,0.1、1和10μg/L组LLC细胞的相对细胞活力降低(P<0.05),细胞凋亡率和Bax蛋白相对表达水平均升高(P<0.05),侵袭细胞数量以及Bcl-2、MMP-2和MMP-9蛋白相对表达水平均降低(P<0.05).(实验二):与0μg/L组比较,10 μg/L组RAW264.7细胞的相对细胞活力降低(P<0.05).与Control组比较,IL-4组RAW264.7细胞的CD206、Arg-1 和 IL-10 水平升高(P<0.05),WA 组 RAW264.7 细胞的 CD206、Arg-1 和 IL-10 水平降低(P<0.05).与 IL-4 组比较,IL-4+WA组 RAW264.7 细胞的 CD206、Arg-1 和 IL-10 水平降低(P<0.05).(实验三):与 Blank 组比较,RAW264.7 组和 IL-4 RAW264.7 组的相对细胞活力和侵袭细胞数量均升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05).与RAW264.7组比较,IL-4 RAW264.7组的相对细胞活力和侵袭细胞数量升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),CD206、Arg-1和IL-10水平升高(P<0.05),CD86百分比降低,CD206百分比升高(P<0.05).与IL-4RAW264.7比较,IL-4RAW264.7+WA组的相对细胞活力和侵袭细胞数量降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),CD206、Arg-1和IL-10水平降低(P<0.05),CD86百分比升高,CD206百分比降低(P<0.05).结论:本研究表明雷公藤内酯甲具有抗NSCLC作用,其机制与抑制巨噬细胞的M2型极化有关.