Provided is a method for transferring mRNA encoding Cas9 protein (Cas9 mRNA) into a mammalian fertilized egg, said method comprising: (a) a step for placing a mixture of a Cas9 mRNA-containing solution with a fertilized egg between electroporation electrodes and (b) a step for applying a voltage between the electrodes at such a voltage level for such a period of time as to achieve an mRNA transfer efficiency (R) that is equal to or higher than the minimum mRNA transfer efficiency (Rmin) calculated from the concentration (c: ng/μl) of Cas9 mRNA.Linvention concerne un procédé permettant de transférer de lARNm codant pour la protéine Cas9 (ARNm de Cas9) dans un ovule fécondé de mammifère, ledit procédé comprenant : (a) une étape consistant à placer un mélange dune solution renfermant de lARNm de Cas9 et dun ovule fécondé entre des électrodes délectroporation et (b) une étape consistant à appliquer une tension entre les électrodes à un certain niveau de tension pendant un certain laps de temps, de façon à atteindre une efficacité de transfert dARNm (R) égale ou supérieure à lefficacité de transfert dARNm minimale (Rmin) calculée à partir de la concentration (c : ng/µl) dARNm de Cas9.本発明は、哺乳動物の受精卵にCas9タンパク質をコードするmRNA(Cas9 mRNA)を導入する方法であって、(a)エレクトロポレーション用電極の間に、Cas9 mRNAを含む溶液および受精卵の混合物を置くこと、(b)Cas9 mRNA濃度c(ng/μl)から算出される最低mRNA導入効率(Rmin)以上のmRNA導入効率(R)を達成する電圧と通電時間で、電極間に電圧をかけること、の各段階を含む方法に関する。
