PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an miRNA scaffold capable of integrating target sequences in order to form a non-naturally occurring miRNA effectively mediating gene knockdown.SOLUTION: A non-naturally occurring miRNA has a stem-loop structure consisting of a scaffold derived from a first endogenous miRNA such as miR-196a-2 or miR-204, a mature chain derived from a second endogenous miRNA, and a star chain sequence at least partially complementary to the sequence of the mature chain. The non-naturally occurring miRNA has a stem-loop structure consisting of a scaffold derived from an endogenous miRNA such as miR-196a-2 or miR-204, a mature chain designed to be at least partially complementary to a target RNA, and a star chain sequence at least partially complementary to the mature chain sequence. In addition, a method and composition mediating gene silencing via the RNAi pathway are provided.【課題】遺伝子ノックダウンを効果的に媒介する非天然存在型miRNA類を形成するためにターゲット配列類を統合できるmiRNA系スキャホールド類を提供する。【解決手段】miR-196a-2またはmiR-204などの第1の内在性miRNAに由来するスキャホールド、第2の内在性miRNAに由来する成熟鎖、および、前記熟成鎖の配列に少なくとも一部相補的であるスター鎖配列からなる、幹-ループ構造を有する非天然存在型miRNA。また、miR-196a-2またはmiR-204などの内在性miRNAに由来するスキャホールド、標的RNAに少なくとも一部相補的であるように設計した成熟鎖、および、前記熟成鎖配列に少なくとも一部相補的であるスター鎖配列からなる、幹-ループ構造を有する非天然存在型miRNA。さらに、RNAi経路による遺伝子サイレンシングを媒体する方法および組成物。【選択図】図2