A lentiviral vector for specifically inhibiting dual miRNA expression, and a construction and application of the lentiviral vector. The lentiviral vector for specifically inhibiting dual miRNA expressions comprises a fundamental sequence, a resistance gene sequence, a multiple cloning site sequence, a promoter sequence, and an oligonucleotide sequence targeting miR-140 and miR-185. A multiple cloning site comprises an Age I enzyme cutting site and an EcoR I enzyme cutting site the oligonucleotide sequence targeting miR-140 and miR-185 is inserted into the multiple cloning site in sense orientation. A pLKO-Tud-140-185 lentiviral expression vector has the advantages of high transfection efficiency, a small amount required, and continuous, efficient, stable and specific inhibition in human miRNA-140-185 expression, and may be used for preparing drugs for treating diseases related to abnormal miRNA-140-185 expression.Linvention concerne un vecteur lentiviral pour inhiber spécifiquement lexpression de miARN double, ainsi quune construction et application de ce vecteur lentiviral. Le vecteur lentiviral selon linvention comprend une séquence fondamentale, une séquence de gène de résistance, une séquence de site de clonage multiple, une séquence de promoteur, ainsi quune séquence doligonucléotides ciblant miR-140 et miR-185. Un site de clonage multiple comprend un site de coupe denzyme Age I et un site de coupe denzyme EcoR I la séquence doligonucléotides ciblant miR-140 et miR-185 est insérée dans le site de clonage multiple dans une orientation sens. Le vecteur dexpression lentivirale pLKO-Tud-140-185 présente les avantages dune efficacité de transfection élevée, dune petite quantité requise et dune inhibition continue, efficace, stable et spécifique de lexpression humaine de miARN-140-185, et il peut être utilisé dans la préparation de médicaments destinés au traitement de maladies liées à lexpression anormale de miARN-140-185.