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一种杜氏盐藻叶绿体转化载体的构建方法
- 专利权人:
- 郑州大学
- 发明人:
- 薛乐勋,潘卫东,侯桂琴,李杰,曲东京,贾岩龙
- 申请号:
- CN201010583119.8
- 公开号:
- CN102121026A
- 申请日:
- 2010.12.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2011
- 代理人:
- 姜振东
- 摘要:
- 一种杜氏盐藻叶绿体转化载体的构建,具体是以光非依赖性的原叶绿素酸酯还原酶chlN、chlB或者chlL基因为同源片段,以氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)和除草剂草丁膦(PPT)的抗性基因bar为筛选标记,并以atpA启动子和rbcL终止子为表达元件,构建双交换双筛选标记杜氏盐藻叶绿体转化载体。通过基因枪法或者电激法转化杜氏盐藻,再经两步法筛选实现同质化,确保外源基因在杜氏盐藻叶绿体基因组的定点整合,最终获得稳定表达外源蛋白的叶绿体转化杜氏盐藻藻株。本发明选取chlN、chlB或者chlL基因作为同源片段,可作为转化子的辅助筛选标记;选择氯霉素抗性CAT基因和草丁膦抗性bar基因共同作为筛选标记基因,有利于在较短时间内获得稳定转化株。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/