本发明公开了一种基于环介导恒温扩增技术快速检测灰葡萄孢菌对SDHI类杀菌剂抗性的方法及引物组合物。用于检测灰葡萄孢菌对SDHI类杀菌剂抗性的引物组合物,由SEQ ID NO.2所示的正向内引物FIP、SEQ ID NO.3所示的反向内引物BIP、SEQ ID NO.4所示的正向外引物F3、SEQ ID NO.5所示的反向外引物B3和SEQ ID NO.6所示的环引物LF组成。本发明的检测方法简便易行、实用性好、灵敏度高、特异性强、准确性高、实现了恒温扩增,为灰葡萄孢菌对SDHI类杀菌剂抗性的检测提供了新的技术平台,能够对灰葡萄孢菌的SDHI类杀菌剂抗性群体进行监测,及时了解抗性群体发展动态。本发明对作物灰霉病的抗药性治理和科学指导用药,降低生产成本,减少农药的环境污染也具有重要的现实意义。