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一种应用于群落分析的植物内生菌基因组总DNA提取及纯化方法
- 专利权人:
- 湖南大学
- 发明人:
- 罗胜联,陈亮,陈觉梁,徐涛英,肖潇,万勇,刘承斌,饶婵
- 申请号：
- CN201010602185.5
- 公开号：
- CN102174509B
- 申请日:
- 2011.02.18
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 颜勇
- 摘要：
- 本发明公开了一种应用于群落分析的植物内生菌基因组总DNA的提取及纯化方法。首先将表面除菌后的新鲜植物组织剪碎研磨至糊状后浸泡在灭菌的磷酸盐缓冲液中，经恒温摇床震荡1小时使微生物细胞从植物组织中脱离出来，静置，悬浮液转入离心管中离心收集微生物菌体，然后加入裂解液振荡混匀使DNA从细胞中释放，再经氯仿-异戊醇反复抽提蛋白，异丙醇离心沉淀和70％冰乙醇洗涤，用DNA特异离心吸附柱纯化得到的粗提基因组总DNA，最后再利用特殊引物进行PCR扩增即可回收得到高质量的用于后续分析的植物内生菌特异性DNA片段。本发明方法具有简单、有效、高质量、污染小等优点，为全面完整地研究植物内生菌群落结构提供了高质量的保证。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
