中华鳖胚胎细胞组织块的原代培养方法
- 专利权人:
- 浙江省淡水水产研究所
- 发明人:
- 曹铮,刘莉,林锋,叶雪平
- 申请号:
- CN201410171766.6
- 公开号:
- CN104059875B
- 申请日:
- 2014.04.28
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 尉伟敏
- 摘要:
- 本发明公开了一种中华鳖胚胎细胞组织块的原代培养方法。本发明步骤为(1)采集中华鳖的受精蛋,消毒;(2)破开受精蛋的蛋壳,将胚胎从蛋黄中剥离出来,将剥离出来的胚胎组织放在1×PBS缓冲液中清洗,然后浸泡灭菌;(3)将胚胎组织放入M199培养基中清洗4-5次,然后转移至完全培养基中并将胚胎组织剪碎得组织块,再将组织块用完全培养基清洗一次;(4)用无菌的一次性接种针均匀分散组织块于细胞瓶的内壁上,使组织块贴壁生长3-4小时,然后加入完全培养基浸没组织块,30-31℃恒温培养3天以上。本发明操作简单,培养方便,无需特定的细胞分离液,培养成功率高。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心