本发明提供了一种检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌(简称单增李斯特菌)的有扩增内标的PCR方法及试剂盒，涉及生物技术领域，本方法使用方便、可靠性好、检测周期短、灵敏度高、特异性强、成本低廉、操作步骤简单，适用于高通量操作、标准化操作。所述方法包括：(1)利用primer premier 6.0软件设计针对单增李斯特菌的一对特异性引物，再增加扩增原核生物16s rDNA保守序列的27F/1492R引物作为扩增内标，2对引物共同使用进行扩增；(2)取待检测样品增菌培养6-8小时；培养后的增菌液采用煮沸冻融法提取基因组DNA作为模板进行扩增；(3)取试剂盒的PCR反应预混液配置25μl反应体系进行扩增，琼脂糖凝胶电泳后紫外灯下观察检测结果。
