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Protein production method
专利权人:
株式会社ニッピ
发明人:
上野 智規,多賀 祐喜,後藤 希代子,加来 祐子
申请号:
JP2015508643
公开号:
JPWO2014157429A1
申请日:
2014.03.26
申请国别(地区):
JP
年份:
2017
代理人:
摘要:
Although it was thought that promotion of polysome formation in which a large number of ribosomes were attached to mRNA was very effective for highly efficient protein synthesis, the mechanism of the poly180 formation promotion function of p180 protein was not clear. The inventors of the present application identified SF3b4 as a protein that specifically interacts with the coiled-coil domain, which is a responsible region for the polysome formation promoting function of the p180 protein, and a protein that promotes endoplasmic reticulum (ER) localization of mRNA. Localization of mRNA on the endoplasmic reticulum in cells that express new proteins and that highly express both proteins that promote mRNA endoplasmic reticulum (ER) localization (eg, SF3b4 protein) and p180 protein It was clarified that the secretion function of cultured cells can be increased. In addition, by inserting a specific nucleotide sequence into the expression plasmid, it is possible to localize the SF3b4 protein, which has a protein expression enhancing effect, on the endoplasmic reticulum membrane, and to shift the weight of mRNA in the polysome. It was shown that the secretory capacity of cells can be enhanced via高効率なタンパク質合成にはmRNAに多数のリボソームの付着したポリソーム形成の促進が非常に効果的であると考えられていたが、p180タンパク質のポリソーム形成の促進機能の機構は明らかではなかった。 本出願の発明者らは、p180タンパク質のポリソーム形成促進機能の責任領域であるcoiled-coilドメインと特異的に相互作用するタンパク質、mRNAの小胞体(ER)局在化を促進するタンパク質としてのSF3b4タンパク質を新たに見出し、そして、mRNAの小胞体(ER)局在化を促進するタンパク質(例えば、SF3b4タンパク質)とp180タンパク質の両方を高発現する細胞において、mRNAの小胞体上への局在化が著しく上昇し、培養細胞の分泌機能を上昇させることが可能となることを明らかにした。また、発現プラスミド中にも特定のヌクレオチド配列を挿入することにより、タンパク質発現増強効果のあるSF3b4タンパク質を小胞体膜上へ局在化、およびポリソーム中mRNAを重量化シフトさせることが可能となり、これを介して細胞の分泌能を増強可能であることが示された。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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