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一种全人源化scFv噬菌体抗体库的构建方法和试剂盒
- 专利权人:
- 上海同进基因科技有限公司
- 发明人:
- 吴兰,黄晓菊,周奇
- 申请号：
- CN201810509403.7
- 公开号：
- CN108676807A
- 申请日:
- 2018.05.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 李芙蓉`孙进华
- 摘要：
- 本发明公开了一种全人源化scFv噬菌体抗体库的构建方法，所述构建方法包括以下步骤：(1)提取HCC患者外周血单个核细胞的总RNA，进行反转录PCR，获得cDNA；(2)以cDNA为模板分别扩增抗体基因VH、kappa链和lambda链；得到第一扩增产物；以步骤(2)的第一扩增产物为模板；使用Linker‑r和Linker‑s以及带有限制性酶切位点的VH上游引物、所述扩增VH的下游引物再次扩增VH；使用Linker‑r和Linker‑s以及所述扩增kappa链的上游引物、带有限制性酶切位点的kappa链下游引物再次扩增kappa链；使用Linker‑r和Linker‑s以及所述扩增lambda链的上游引物、带有限制性酶切位点的lambda链下游引物再次扩增lambda链；得到第二扩增产物；使用带有限制性酶切位点的连接引物将第二扩增产物中的VH、kappa链和lambda链拼接成scFv基因库。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
