本发明涉及一种高活性凝血因子IX突变体、重组蛋白与融合蛋白的制备与应用，突变体核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。制备方法包括如下步骤：(1)将凝血因子IX基因连入载体中，得到重组载体；(2)将上述重组载体转化宿主细胞，得到表达突变凝血因子IX蛋白细胞克隆；(3)于无血清培养基中连续灌流培养上述细胞克隆，诱导重组高活性凝血因子IX突变蛋白的表达；(4)分离纯化、过滤，最后灌装、冻干，即得。本发明证实了IX突变Arg384Gln确实导致凝血因子IX活性升高，而且没有导致除凝血机制异常之外的其他危害，对人体是安全的，打破了现有研究的技术偏见，具有很好的基因治疗和替代治疗前景。
