本发明涉及植物基因工程技术领域,尤其涉及一种白花虎眼万年青矮化多分蘖OtDWARF53基因及应用。其核苷酸序列如SEO ID NO.1所示,该基因编码的蛋白的氨基酸序列如SEO ID NO.2所示;本发明在已经获得的白花虎眼万年青叶上珠芽的诱导和组织培养的发明专利的基础上,以及根据白花虎眼万年青三代和二代转录组联合分析的结果(3+2),从中分离出来了调控独脚金内酯的关键基因DWARF53(DWF53),并构建了组成型植物表达载体pHB+ OtDWARF53,将其转入烟草中,发现转基因烟草出现了植株矮化、茎尖产生多个顶芽、叶腋形成腋芽侧芽、外形更加丰满等表型,表明该基因能够使得植株矮化、及促进多分蘖多分枝的功能,具体是该基因在调节植株高度和促进腋芽侧芽发育等调控株型中的应用。