热稳定的Cas9核酸酶。本发明涉及遗传工程领域,并且更特别地涉及核酸编辑和基因组修饰。本发明提供了一种分离的Cas蛋白或其多肽片段,所述分离的Cas蛋白或其多肽片段具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列或与SEQ ID NO:1具有至少77%同一性的序列,其中所述Cas蛋白或多肽能够在50℃与100℃(包括端点)的范围内的温度进行DNA裂解。本发明还提供了编码所述Cas9核酸酶的分离的核酸分子、表达载体和宿主细胞。本文公开的Cas9核酸酶提供了用于在升高的温度进行遗传工程的新型工具,并且在嗜热生物体特别地微生物的遗传操作中具有特别的价值。