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一种重组人脂蛋白相关磷脂酶A2蛋白的制备方法及其专用工程菌
- 专利权人:
- 山东莱博生物科技有限公司
- 发明人:
- 朱之炜,陈振,欧兰香,李丽,王佳颖,王岩
- 申请号：
- CN201611204663.0
- 公开号：
- CN106591257A
- 申请日:
- 2016.12.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 王绪银
- 摘要：
- 本发明公开了一种重组人脂蛋白相关磷脂酶A2蛋白的制备方法及其专用重组大肠杆菌工程菌，是通过A、基因的制备：PCR引物的设计及人Lp‑PLA2基因片段的扩增。B、重组质粒的构建：经NdeI和SalI酶切得大小为1272bp的Lp‑PLA2基因片段，将其克隆到高拷贝质粒pBVH上，得到重组质粒pBVH‑PLA2；C、工程菌的构建：用转化方法将质粒pBVH‑PLA2导入到E.coil Rosetta(DE3)；D、通过热诱导液体发酵能产生有活性、可溶性的重组人脂蛋白相关磷脂酶A2蛋白实现。试验证实本发明的重组人Lp‑PLA2抗原具有良好的抗原性，易被市售的Lp‑PLA2抗体识别，用其免疫动物能够产生高度特异性的单克隆抗体和多克隆抗体，该抗体可应用于人Lp‑PLA2的体外检测，在医疗等领域具有一定的应用前景。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
