利用Cas9切割核酸酶介导Ipr1定点插入获取转基因牛胎儿成纤维细胞的方法
- 专利权人:
- 西北农林科技大学
- 发明人:
- 张涌,袁梦珂,高元鹏,韩静,马晓楠,吴腾
- 申请号：
- CN201710855259.8
- 公开号：
- CN107619837A
- 申请日:
- 2017.09.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 范巍
- 摘要：
- 本发明公开了一种利用Cas9切割核酸酶介导Ipr1定点插入获取转基因牛胎儿成纤维细胞的方法，本发明通过电穿孔的方法将供体载体和针对打靶位点的CRISPR/Cas9表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞，供体载体中MSR1启动子可以使Ipr1实现在专职吞噬性细胞中的特异性表达，嘌呤霉素药物筛选后，经过PCR鉴定获得打靶的阳性克隆细胞。以该转基因阳性克隆细胞为核供体，获得转基因克隆胚胎，进一步将转基因克隆胚胎移植到发情的受体牛子宫内，最终获得成活的Ipr1定点插入转基因克隆牛。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
