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利用家蚕核型多角体病毒载体系统过量表达microRNA的方法
- 专利权人:
- 西南大学
- 发明人:
- 刘仕平,夏庆友
- 申请号：
- CN201610987037.7
- 公开号：
- CN106636208A
- 申请日:
- 2016.11.10
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 夏艳
- 摘要：
- 本发明是一种利用家蚕核型多角体病毒载体系统过量表达microRNA的方法，双酶切验证重组报告基因穿梭载体，通过Tn7同源重组把let‑7‑C和报告基因转座到家蚕核型多角体病毒基因组上，获得重组杆状病毒质粒，并转染家蚕胚胎细胞系BmE，以荧光定量PCR检测重组杆状病毒在不同时间点的增殖和miRNA的表达，离心收集转染72h后的BmE细胞上清液，用于侵染新鲜的BmE细胞，以获取具有强感染力的重组病毒上清，将其注射至家蚕五龄起蚕，检测miRNA的表达。利用家蚕核型多角体病毒表达载体在家蚕胚胎细胞系BmE和家蚕脂肪体组织中过量表达了let‑7簇miRNA，为后续研究家蚕miRNA的功能提供了可能。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
