本发明属于基因工程技术领域,具体涉及重组人血管紧张素转化酶2蛋白及其制备方法和应用。所述重组人血管紧张素转化酶2蛋白可竞争性结合ACE2配体,通过对设计的全长、膜外区、穿膜区的相关氨基酸进行突变获得亲水性的ACE2全长蛋白;所述重组人血管紧张素转化酶2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示。利用原核表达系统将该基因在大肠杆菌PET‑3C中进行表达,随后利用His标签可溶性蛋白纯化进行蛋白纯化,获得重组人血管紧张素转化酶2蛋白。所制备得到的重组人血管紧张素转化酶2蛋白与膜外重组蛋白具有更高的配体亲和性、稳定性和生物半衰期,从而提高其成药性。