本发明公开了一种魔芋芋花叶病毒的荧光定量PCR检测方法,属于植物病虫害检疫领域。本发明针对芋花叶病毒(DsMV)的衣壳蛋白基因(cp)中间部分核心序列的寡核苷酸设计两条序列如SEQ ID NO.1和2所示的引物,通过提取魔芋的总RNA、反转录得到cDNA,再以cDNA为模板进行荧光定量PCR,利用反应中荧光信号的有无来判定魔芋有无感染DsMV。本发明利用PCR技术的高效扩增、SYBR Green I荧光染料和计算机辅助荧光检测技术敏感性的优点,克服了常规PCR检测的不足,极大的提高了检测的敏感性、特异性和操作的便利性,为魔芋种植区的魔芋芋花叶病毒病的监测、防治等提供了有效手段。