Ingolf, Dr. Lachmann,Gabor G. Dr. Kovacs,Uta, Dr. Wagner,Awad A., Dr. Osman
申请号：
DE102011008153
公开号：
DE102011008153B4
申请日:
2011.01.08
申请国别(地区):
DE
年份:
2018
代理人:
摘要：
Verfahren zur Herstellung eines monoklonalen Antikörpers gegen pathologisches oligomeres Alpha-Synuclein durchImmunisierung von Mäusen oder In-vitro-Zellkulturen mit dem Peptid TKEGWHGVATVAE des Alpha-Synucleins, gekoppelt an einen Träger, zur Induktion einer adäquaten Immunantwort in Adjuvant,Entnahme der B-Lymphozyten, Fusion dieser mit der für eine nachfolgende Selektion von Fusionszellen geeigneten murinen Myelomzelllinie P3X63 Ag8.653 unter Verwendung von Polyethylenglycol 1500,nachfolgender HAT-Selektion der Fusionsprodukte in Zellkulturgefäßen, Auswahl Immunglobulin produzierender und unter Selektionsbedingungen wachsender Hybridome und aufgrund ihrer Reaktivität gegenüber dem Immunogen oder pathologischem, oligomerem Alpha-Synuclein,Vereinzeln der Hybridome auf Einzelzellebene zur Sicherstellung der Monoklonalität der Hybridomkultur,Kultivierung der Hybridome, wobei das Kultivieren der Hybridome in vitro oder in vivo monoklonale Antikörper 5G4/F7 ergibt, die das Epitop HGVA auf pathologischem, oligomerem Alpha-Synuclein erkennen.A method for producing a monoclonal antibody to pathological oligomeric alpha-synuclein by immunization of mice or in vitro cell cultures with the peptide TKEGWHGVATVAE of the alpha-synuclein coupled to a carrier to induce an adequate immune response in adjuvant, withdrawal of B-lymphocytes, fusion this with the suitable for a subsequent selection of fusion cells murine myeloma cell line P3X63 Ag8.653 using polyethylene glycol 1500, subsequent HAT selection of fusion products in cell culture vessels, selection of immunoglobulin-producing and selection conditions growing hybridomas and because of their reactivity to the immunogen or pathological oligomeric Alpha-synuclein, singulating the hybridomas at the single cell level to ensure monoclonality of the hybridoma culture, culturing the hybridomas, wherein culturing the hybridomas in vitro or in vivo gives monoclonal antibodies 5G4 / F7 containing the epit op HGVA on patho
