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一种基于同源重组技术的磷酸化突变体SUFU转基因小鼠模型的构建及应用
- 专利权人:
- 南京医科大学
- 发明人:
- 张子宇,俞婷婷,韩博昂,程雁,刘晨,乐珅,王瑜
- 申请号：
- CN202110667220.X
- 公开号：
- CN113832107A
- 申请日:
- 2021.06.16
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2021
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明提供了一种基于同源重组技术的磷酸化突变体SUFU转基因小鼠模型的构建及应用，包括如下步骤：构建出含有磷酸化突变体SUFU基因的打靶载体pROSA26PA；将其线性化后转染129/S6ES细胞；利用PCR法扩增并测序筛选发生正确同源重组的ES细胞克隆；显微注射技术将ES细胞注入C57BL/6小鼠的囊胚中，与C57BL/6小鼠交配，产生出棕色和黑色小鼠；对棕色小鼠用PCR方法筛选出阳性小鼠，与Ddx4‑Cre小鼠交配，通过PCR筛选得到杂合型F1代小鼠；自交得到F2代小鼠，筛选出纯合F2代小鼠，即为磷酸化突变体SUFU转基因小鼠模型。本发明可用于研究SUFU对Hedgehog(Hh)信号通路的双向调控机制，将其引入Ptch+/‑自发髓母细胞癌小鼠模型中可进一步研究Hh亚型髓母细胞癌的发病机制，为筛选新一代抗髓母细胞癌的Hh拮抗剂提供有力工具；且该模型小鼠也可应用于研究Hh对精子发育的影响。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
