本发明公开了一种含有胰高血糖素样肽-1的融合蛋白及制备方法与应用。该融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过基因工程的方法,突变已知序列的一个氨基酸,得到编码本发明所述的融合蛋白的核苷酸序列;接着将该核苷酸序列克隆入表达载体中,通过表达、纯化,得到本发明所述的融合蛋白。本发明所提供的含有GLP-1的融合蛋白使GLP-1的生理作用具有更好的稳定性和持续性,而且,药效学结果表明,该融合蛋白具有显著的降低血糖效果。另外,经过长期注射本发明所提供的融合蛋白,能显著提高糖耐受性,刺激胰岛素的分泌,保护胰岛β细胞,延缓糖尿病病程的发展。因而本发明所提供的GLP-1融合蛋白非常具有优势和潜力应用于临床治疗。