TRANSKARYOTIC THERAPIES, INC.;SHIRE HUMAN GENETIC THERAPIES, INC.
发明人:
SELDEN, RICHARD F.,BOROWSKI, MARIANNE,TRECO, DOUGLAS A.,GILLESPIE, FRANCES P.,KINOSHITA, CAROL M.,WILLIAMS, MELANIE D.
申请号：
ES04030107
公开号：
ES2458292T3
申请日:
1997.09.12
申请国别(地区):
ES
年份:
2014
代理人:
摘要：
A method of producing purified human α-Gal A, comprising (a) culturing a genetically engineered human cell to overexpress and secrete human α-Gal A in a medium, (b) collecting the medium comprising α-Gal A human from said cultured cells, and (c) purifying human α-Gal A from the medium by (i) passing the medium through a hydrophobic interaction resin and eluting human α-Gal A from the resin, and (ii) passing eluted human α-Gal A on columns containing an immobilized heparin resin, hydroxyapatite, an anion exchange resin and a size exclusion resin and eluting purified human α-Gal A from the final column, where purified human α-Gal A is free of protein lectin affinity agents and α-Gal A substrate analog agents.Un método de producción de &alpha；-Gal A humano purificado, que comprende ( a) cultivar una célula humana por ingeniería genética modificada para sobreexpresar y secretar &alpha；-Gal A humano en un medio , ( b) recoger el medio que comprende el &alpha；-Gal A humano a partir de dichas células cultivadas , y (c ) purificar &alpha；-Gal A humano a partir del medio por (i ) pasar el medio a través de una resina de interacción hidrófoba y eluyendo &alpha；-Gal A humano de la resina , y (ii ) hacer pasar el &alpha；-Gal A humano eluido sobre columnas que contienen una resina de heparina inmovilizada, hidroxiapatito , una resina de intercambio de aniones y una resina de exclusión de tamaño y eluyendo &alpha；-Gal A humano purificado de la columna final, donde el &alpha；-Gal A humano purificado este libre de agentes de afinidad de lectina proteica y agentes análogos de sustrato de &alpha；-Gal A.
