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一种获得山羊诱导性多能干细胞的新方法
专利权人:
扬州大学
发明人:
李碧春,张亚妮,邱峰龙,左其生,李东,张蕾,连超,汤贝贝,王颖洁
申请号:
CN201510195770.0
公开号:
CN104762265A
申请日:
2015.04.22
申请国别(地区):
中国
年份:
2015
代理人:
缪友菊
摘要:
本发明公开了一种获得山羊诱导性多能干细胞的新方法:本方法首先从山羊睾丸组织、皮肤组织和小肠组织中提取总RNA,反转录获得cDNA片段,并以此为模版克隆获得山羊的Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc多能性转录因子的编码序列。利用胰酶消化法获得山羊及小鼠的胎儿成纤维细胞,并制备饲养层细胞和配制细胞培养液。利用体外转录试验获得的各多能性转录因子的mRNA,经脂质体2000介导,转染山羊胎儿成纤维细胞,以制备山羊iPS细胞。克隆扁平、致密、核质比大、克隆边界清晰和折光性强的细胞集落判定为山羊iPS细胞集落。采用单克隆挑取,分别用胰酶消化,单独接种至新的接种有饲养层的培养孔板中继续培养,以获得山羊iPS细胞系。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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