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一种获得山羊诱导性多能干细胞的新方法
- 专利权人:
- 扬州大学
- 发明人:
- 李碧春,张亚妮,邱峰龙,左其生,李东,张蕾,连超,汤贝贝,王颖洁
- 申请号:
- CN201510195770.0
- 公开号:
- CN104762265A
- 申请日:
- 2015.04.22
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 缪友菊
- 摘要:
- 本发明公开了一种获得山羊诱导性多能干细胞的新方法:本方法首先从山羊睾丸组织、皮肤组织和小肠组织中提取总RNA,反转录获得cDNA片段,并以此为模版克隆获得山羊的Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc多能性转录因子的编码序列。利用胰酶消化法获得山羊及小鼠的胎儿成纤维细胞,并制备饲养层细胞和配制细胞培养液。利用体外转录试验获得的各多能性转录因子的mRNA,经脂质体2000介导,转染山羊胎儿成纤维细胞,以制备山羊iPS细胞。克隆扁平、致密、核质比大、克隆边界清晰和折光性强的细胞集落判定为山羊iPS细胞集落。采用单克隆挑取,分别用胰酶消化,单独接种至新的接种有饲养层的培养孔板中继续培养,以获得山羊iPS细胞系。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/