本发明公开了基因II型草鱼呼肠孤病毒的检测方法，包括下述步骤：1)提取草鱼样品的RNA，加入到预混反应液中利用两对引物对基因II型草鱼呼肠孤病毒的保守区序列进行环介导等温核酸扩增，其中所用的引物分别为引物GCRVII-F3序列SEQ ID No：1、引物GCRVII-B3序列SEQ ID No：2；引物GCRVII-FIP序列SEQ ID No：3、引物GCRVII-BIP序列SEQ ID No：4；并标记FITC探针，探针GCRVII-FITC-Probe序列SEQ ID No：5；2)将扩增产物滴加到LFD试纸的点样位置上，然后在点样处前端滴缓冲液，待缓冲液移动到试纸的另一端至反应结束，根据试纸条上的显色带判定检测结果。本发明的检测方法及其试剂盒结合了等温扩增和核酸试纸条快速检测技术，具有操作简单、检测可靠性高、特异性好、灵敏度高的特点。
