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一种丝氨酸-色氨酸蛋白激酶基因及制备方法和应用
- 专利权人:
- 武汉大学
- 发明人:
- 饶晓兰,张秀红,吕应堂
- 申请号:
- CN201010136294.2
- 公开号:
- CN101906429A
- 申请日:
- 2010.03.26
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2010
- 代理人:
- 王敏锋
- 摘要:
- 本发明公开了一种丝氨酸-色氨酸蛋白激酶基因及制备方法和应用,其步骤是:A、提取水稻两周幼苗RNA,并通过RT-PCR反转录得到含有水稻cDNA文库,利用设计的引物CACCCAGCCAACCTTGATGAATG和CTCATATCCTCAGCCGCATC从A步中得到的水稻幼苗cDNA文库里扩增得到一个蛋白激酶基因克隆,片断长度为400bp;B、将A步获得的基因片断连接到中间载体pENTRTM/D-TOPO中,得到中间载体质粒;C、将B步获得的质粒利用重组LR反应,连入水稻抑制表达载体pANDA中,形成转化的表达质粒载体。D、将C步获得的质粒转入农杆菌,导入成熟胚诱导的水稻愈伤组织中,得到农杆菌感染的水稻愈伤,进一步分化成植株。该方法易行,操作简化,简化了水稻抑制表达转基因植株,该基因有效地提高了水稻抗逆性,其转基因植株在高盐条件下芽发率较高。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/