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一种百合SuSy3基因的克隆及植物表达载体的构建方法
- 专利权人:
- 沈阳农业大学
- 发明人:
- 孙红梅,李雪艳,王春夏,程金云
- 申请号：
- CN201511011437.6
- 公开号：
- CN105543252A
- 申请日:
- 2015.12.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 张述学
- 摘要：
- 本发明公开了一种百合SuSy3基因的克隆及植物表达载体的构建方法，用改良CTAB法提取兰州百合鳞茎的总RNA，测定OD260/OD280以及OD260/OD230比值；通过PCR和RACE技术获得了SuSy3基因的全长片段，将PCR产物进行凝胶回收，回收后的产物连接至pMD18-T载体，转化大肠杆菌后进行质粒提取，将提取的质粒进行PCR验证，获得了2805bp的DNA条带；测序后发现该基因ORF为2541bp，编码846个氨基酸的多肽。最终利用Gateway技术，成功构建得到SuSy3的过表达载体pMDC-SuSy3，转化结束后进行质粒的提取，将质粒进行PCR验证，获得了大小为2677bp的目的基因条带及260bp的GUS条带，测序结果说明载体构建成功，重新命名为pMDC-SuSy3。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
