PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for mass-producing natural killer cells and use of the natural killer cells as an anticancer agent.SOLUTION: A method for producing fresh NK (natural killer) cells is provided, the method comprising the steps of: 1) obtaining CD3-negative cells by removing CD3-positive T cells from monocytes； and 2) mixing the CD3-negative cells with IL-15 and IL-21 for cultivation after that, wherein the step 1) is performed by allowing the CD3-positive T cells to crosslink to erythrocytes and then isolating the CD3-negative cells by density-gradient in centrifugation. The fresh NK cells, cold-preserved NK cells and cryopreserved NK cells thus produced can exhibit therapeutic effects against various cancers, including colorectal cancer, lung cancer, liver cancer, pancreatic cancer and leukemia, and can be effectively used as cellular therapeutic agents.SELECTED DRAWING: Figure 7aCOPYRIGHT: (C)2020,JPO&INPIT【課題】ナチュラルキラー細胞の大量生産方法及び該ナチュラルキラー細胞の抗癌剤としての用途の提供。【解決手段】１）単核球からＣＤ３陽性のＴ細胞を除去してＣＤ３陰性細胞を収得するステップと；２）ステップ１）のＣＤ３陰性細胞にＩＬ－１５及びＩＬ－２１を混合処理した後、培養するステップと；を含む、新鮮（ｆｒｅｓｈ）ＮＫ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｋｉｌｌｅｒ）細胞の製造方法であって、前記ステップ１）は、ＣＤ３陽性のＴ細胞と赤血球を交差結合させた後、遠心分離に際して、密度勾配を用いてＣＤ３陰性細胞を分離することにより行われる方法。得られた新鮮ＮＫ細胞、冷蔵保存ＮＫ細胞、及び冷凍保存ＮＫ細胞は、大腸癌、肺癌、肝臓癌、膵臓癌及び白血病を含む様々な癌に対して治療効果を示し、細胞治療剤として有用に使用することができる。【選択図】図７ａ
