The present invention provides improved methods for lipid nanoparticle formulations and mRNA encapsulation. In some embodiments, the present invention provides a method of encapsulating messenger RNA (mRNA) in lipid nanoparticles, comprising mixing a preformed lipid nanoparticle and mRNA solution. In particular, the present invention relates to the unexpectedly efficient in vivo delivery of mRNA and the encoding of proteins and / or peptides encoded by mRNA by combining preformed lipid nanoparticles with mRNA. This results in formed particles that exhibit surprisingly strong expression.本発明は、脂質ナノ粒子製剤およびmRNA封入のための改善された方法を提供する。いくつかの実施形態では、本発明は、予め形成された脂質ナノ粒子とmRNAの溶液を混合する工程を含む、脂質ナノ粒子にメッセンジャーRNA(mRNA)を封入する方法を提供する。特に、本発明は、予め形成された脂質ナノ粒子をmRNAと組み合わせることにより、mRNAを封入することが、mRNAの予想外に効率的なin vivo送達、ならびにmRNAがコードするタンパク質および/またはペプチドの驚くべき強力な発現を示す形成された粒子をもたらす。