An in vitro method of preparing insulin-producing cell clusters for transplantation into a subject, comprising (a) seeding pancreatic progenitor cells onto a three-dimensional, porous scaffold at a seeding density greater than about 12.5 million cells per cm3 of scaffold and less than about 150 million cells per cm3 of scaffold, wherein the scaffold comprises a plurality of pores having an average pore diameter greater than about 225 µm and less than about 550 pm, and (b) culturing the cells on the scaffold for more than about 3 days in culture medium to obtain insulin-producing cell clusters within the pores of the scaffold for transplantation into a subject. In exemplary aspects, the pancreatic progenitor cells are cells derived from pluripotent stem cells.L'invention concerne un procédé in vitro de préparation d'amas de cellules produisant de l'insuline pour une transplantation chez un sujet, comprenant (a) l'ensemencement de cellules progénitrices pancréatiques sur un échafaudage poreux, tridimensionnel, à une densité d'ensemencement supérieure à environ 12,5 millions de cellules par cm3 d'échafaudage et moins d'environ 150 millions de cellules par cm3 d'échafaudage, l'échafaudage comprenant une pluralité de pores ayant un diamètre de pore moyen supérieur à environ 225 µm et inférieur à environ 550 pm, et (b) la culture des cellules sur l'échafaudage pendant plus d'environ 3 jours dans un milieu de culture pour obtenir des amas de cellules produisant de l'insuline à l'intérieur des pores de l'échafaudage pour une transplantation chez un sujet. Selon des aspects donnés à titre d'exemple, les cellules progénitrices pancréatiques sont des cellules dérivées de cellules souches pluripotentes.
