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分离反转录转座子长末端重复序列的方法
- 专利权人:
- 河南科技大学
- 发明人:
- 郭大龙,侯小改,刘崇怀,郑玉萍,魏素玲,贾甜
- 申请号:
- CN201110001717.4
- 公开号:
- CN102140450B
- 申请日:
- 2011.01.06
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 苗强
- 摘要:
- 分离反转录转座子长末端重复序列的方法,以基因组DNA作为模版,利用RNaseH1引物分别与不同的退火控制引物组合进行第一次PCR反应,后通过第一次的PCR产物进行稀释,做为模板,使用RNaseH2引物与通用引物UP进行第二次PCR反应扩增,进行转化、质粒DNA的提取,进行序列测序,得到RNaseH酶的氨基酸序列,并编码蛋白。本方法相对于普通PCR技术具有操作简单,易直接瞄准反转录转座子长末端重复序列区,针对性强,与流式磁珠反向杂交法相比,免去杂交、洗脱、筛选等过程,流程简化,且效率高,与其它的分离方法相比,减少时间消耗、快速获得目的片段,在较短时间内将长末端重复序列克隆,减少假阳性率的发生。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/