Provided are improved methods using Glycogen synthase kinase 3 (GSK3) inhibitors by which endodermal cells, notably endodermal cells derived from human pluripotent stem cells (hPS), such as but not limited to hiPS-cells and hES-cells may be differentiated into hepatocyte like cells. The specific modulation of wingless integration gene (WNT)-signalling pathway and use of GSK3 inhibitors achieve direct differentiation and maturation of hepatocytes derived from human pluripotent stem (hPS) cells. GSK-3 inhibitors, when added to the growth medium at certain developmental stages, leads to more mature and functional features for the hepatocyte like cells as well as more pure and homogenous populations of hepatocyte like cells. Provided are also hepatocyte like cells obtained by these methods as well as compositions comprising them.グリコーゲンシンターゼキナーゼ3(GSK3)阻害剤を用いる改良方法を内胚葉細胞のいずれかによって提供される。特にヒト多能性幹細胞(hPS)由来の内胚葉細胞であって、例えば、hiPS細胞とhES細胞が肝細胞用細胞に分化されてもよいがこれに限られない。特定のウィングレス インテグレーション ジーン(wingless integration gene)(WNT)シグナル経路の調節及びGSK3阻害剤の使用は、ヒト多能性幹(hPS)細胞由来の肝細胞の成熟及び分化誘導を達成させる。特定の発生段階で成長培地に添加されたとき、GSK3阻害剤はより成熟させ、肝細胞様細胞の均質集団と同等以上に純粋な肝細胞様細胞のための機能的な特徴を導く。また、これらの方法を含む組成と同様にこれらの方法で取得された肝細胞様細胞が提供される。【選択図】図1
