脲酶米氏常数测定方法
- 专利权人:
- 山东理工大学
- 发明人:
- 盛桂华,陈相飞,胡晓明,徐英,韩艳伟,陈杰,王峰,朱海亮
- 申请号：
- CN201510004502.6
- 公开号：
- CN104697990A
- 申请日:
- 2015.01.06
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及一种脲酶米氏常数测试方法即脲酶-酚红法，属于生物化学和应用酶学技术领域。本发明所提供的测试方法是以一系列不同浓度的尿素溶液为底物，酚红为指示剂，在脲酶的作用下，尿素分解产氨，pH值上升，在酚红指示剂的作用下，体系的颜色变深，吸光度增加，用分光光度计或酶标仪测吸光度。酶促反应速率与吸光度值的增加成正比，因此可以用吸光度增加值的倒数1/△A代替双倒数方程1/V=Km/（Vmax[S]）+1/Vmax中的1/V，对底物尿素浓度的倒数1/[S]作图，根据双倒数方程可得直线在X轴上的截距即为-1/Km，求得Km值。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
