Methods and composition for production of T cells are provided. Also provided are therapeutic methods using engineered T cells. For example, in certain aspects methods include preparing three dimensional cell culture compositions comprising stroma cells and hematopoietic stem or progenitor cells in a serum-free medium for producing T cells.La présente invention concerne des méthodes et une composition pour la production de lymphocytes T. L'invention concerne également des méthodes thérapeutiques utilisant lesdits lymphocytes T génétiquement modifiés. Par exemple, dans certains aspects, lesdites méthodes consistent à préparer des compositions de culture cellulaire tridimensionnelle comprenant des cellules de stroma et des cellules souches ou progénitrices hématopoïétiques dans un milieu asérique pour la production de lymphocytes T.